Obiectivul major al proiectului este identificarea biomarkerilor de aparitie si progresie a cancerului de prostata.

Obiectivele specifice sunt:

1. Recoltarea  unui numar mare de probe biologice si obtinerea  datelor clinice pentru cercetarea biomarkerilor cancerului de prostata, in 4 populatii europene.

Este nevoie de un numar mare de probe biologice si de informatii diagnostice si clinice exacte, care sa permita identificarea asociatiilor dintre variatiile genetice mostenite si formele subclinice ale cancerului de prostata. In acest sens, vor fi luate in studiu 4 populatii europene, fiecare avind trasaturi epidemiologice si aspecte clinice distincte. Rezultatul acestui obiectiv specific va fi colectarea probelor biologice si a datelor clinice pentru aprox.8.000 cazuri de cancer de prostata din diferite parti ale Europei. In Romania, se vor colecta date clinice si probe biologice de la 1000 de cazuri de cancer de prostata si martori. Colectia de biospecimene va fi folosita, impreuna cu celelalte  trei deja existente, pentru a stabili daca variantele genetice ereditare pot fi considerate biomarkeri de aparitie si progresie a bolii.

2. Testarea utilitatii variantelor genetice de risc pentru cancerul de prostata ca  biomarkeri de progresie si severitate si consecinte ale bolii.

Rezultatele studiului asociatiei  dintre structura genomului si  cancerul de prostata au fost corelate cu datale disponibile din literatura, pentru a identifica variantele genetice care prezinta frecvente diferite in functie de agresivitatea bolii: cancer agresiv de prostata (scor Gleason6, stadiul T3 sau T4, si/sau metastaza) fata de cazuri de cancer in stadiu incipient (scor Gleasonlt6, stadiul T1a-T2b). Aproximativ 3.000 dintre aceste variante vor fi selectionate pentru replicare in cadrul studiului. In plus, vor fi selectate 20 dintre variantele genelor candidate, raportate anterior, pentru a testa asocierea lor cu fenotipul bolii.

Vor fi genotipate peste 8.000 cazuri de cancer de prostata, din 4 regiuni diferite al Europei si un numar mare de martori pentru aceste cazuri, iar rezultatele vor fi analizate in context clinic. Se va studia daca variantele de risc se asociaza cu una din urmatoarele situatii:

i.  Stadiul si gradul bolii;

ii.  Varsta la diagnosticarea bolii;

iii. Recurenta;

iv.  Supravietuirea;

v.   Antecedente familiale de boala.

3. Elucidarea mecanismelor biologice care determina riscul crescut de cancer  de prostata

Vor fi utilizate metode moderne de biologie moleculara si celulara pentru a caracteriza aspectele functionale ale variantelor asociate cu diferite forme clinice de boala, folosind exclusiv celule si tesuturi provenite de la pacienti cu cancer de prostata si subiecti cu hiperplazie benigna de prostata. A fost identificata o varianta Chr 8q24, care este asociata reproductibil cu un scor Gleason crescut si urmeaza testarea altor variante in acest sens. Studiile functionale vor fi axate pe doua variante, si anume Chr8q24 si varianta la nivelul factorului de transcriptie TCF2. Ca prim pas, vor fi create culturi primare de celule epiteliale prostatice umane non-neoplazice, provenite de la 20 subiecti. Celulele vor fi genotipate in scopul identificarii purtatorilor variantelor, care vor fi folositi pentru a obtine linii celulare model pentru studii functionale. Pentru a elucida functia variantei Chr 8q24, vor fi amplificate si subregulate unele transcrieri selectionate (identificate anterior prin RACE si in cadrul unui proiect microarray),  folosind vectori lenti virali si ARNsh stabil. Se va face o comparatie intre expresia globala a genei si modificarile functionale la nivelul  celulelor care exprima in exces sau in deficit genele candidate, pentru a identifica caile metabolice relevante, implicate.